Automatyczny Analizator Aminokwasów SYKAM
Analiza aminokwasów: Automatyczny Analizator Aminokwasów SYKAM
Analiza aminokwasów na standardowych HPLC jest skomplikowanym i pracochłonnym zadaniem. Zazwyczaj obejmuje złożoną procedurę derywatyzacji aminokwasów w próbkach. Procesy derywatyzacji przedkolumnowej są drogie, pracochłonne wprowadzają błąd powtarzalności. Dlatego takie prowadzenie badań składu aminokwasowego jest zadaniem żmudnym i wrażliwym na błędy.
Jako odpowiedź na te problemy powstał Automatyczny Analizator Aminokwasów SYKAM z postkolumnową derywatyzacją ninhydrynową.
Precyzyjne badania aminokwasów bez wstępnej derywatyzacji
Firma SYKAM stworzyła dedykowany Automatyczny Analizator Aminokwasów przeznaczony do pomiaru składu aminokwasowego próbki. Urządzenie działając w zaprogramowany sposób, wykorzystuje postkolumnową reakcję rozdzielonych aminokwasów z ninhydryną, co wykorzystuje się w ich detekcji. Użytkownik otrzymuje wyniki w postaci chromatogramów oraz raporty dopasowywane do potrzeb analityka. Technika derywatyzacji postkolumnowej jest rekomendowana przez Komisję Europejską jako referencyjna np. w badaniach aminokwasów w produktach paszowych.
Dyrektywa Komisji Europejskiej dotycząca badań aminokwasów
Do pobrania dokument Komisji Europejskiej (Commission Directive 98/64/EC of 3 September 1998 establishing Community methods of analysis for the determination of amino-acids, crude oils and fats, and olaquindox in feedingstuffs and amending Directive 71/393/EEC (Text with EEA relevance))
Możliwości Automatycznego Analizatora Aminokwasów SYKAM:
- Badanie stężeń wolnych aminokwasów (np. płyny fizjologiczne, wolne aminokwasy w próbkach żywnościowych, nawozach itp.)
- Badanie stężeń aminokwasów po hydrolizie: kwaśnej / zasadowej / fizycznej / enzymatycznej - próbki żywnościowe, suplementy diety, preparaty białkowe
Inne typowe zastosowania:
Przy zastosowaniu dedykowanej kolumny i zestawu odczynników Automatyczny Analizator Aminokwasów SYKAM może badać zawartość amin biogennych (histamina, putrescyna, kadawaryna, spermidyna, spermina, agmatyna, tyramina, itp.). Badania amin biogennych są istotne z punktu oceny świeżości żywności oraz dodatków do żywności i dodatków paszowych. Warto podkreślić fakt, że aminy biogenne negatywnie wpływają na płodność zwierząt hodowlanych. Dlatego zawartość amin biogennych w paszach i dodatkach paszowych musi pozostawać pod kontrolą laboratoryjną.
Derywatyzacja postkolumnowa daje wysoką powtarzalność pomiarów ilościowych i jakościowych w badaniach aminokwasów i amin biogennych!
- Nie jest wymagana znajomość zagadnień analityczno badawczych przez osoby zamierzające wykorzystywać nasz analizator. Nasze szkolenie zapewnia wydajną i komfortową pracę i prowadzenie badań.
- Badanie produktów we własnym laboratorium umożliwia stosowanie szybkiego cyklu kontroli jakości produkcji.
- Nie wysyłasz próbek do analizy do zewnętrznego kontrahenta i nie płacisz za każdą próbkę
- Badasz produkty u siebie każdorazowo, gdy jest to potrzebne.
- Nowoczesna kontrola jakości produktów daje korzyści wizerunkowe. Pozwala na postrzeganie Twojej marki jako odpowiedzialnej i dbającej o jakość
- Pozwala monitorować proces produkcji i reagować natychmiast na ewentualne problemy
O producencie aminoanalizatora:SYKAM - Niemiecki producent nowoczesnych chromatografów cieczowych
SYKAM jest niemieckim producentem ergonomicznych, nowoczesnych chromatografów HPLC. W ofercie SYKAM znajduje się bardzo szeroki wybór urządzeń chromatograficznch, w tym wykonywane na miejscu części do chromatografów, zawory, elementy z PEEK, uszczelki itp.
SYKAM oferuje systemy izokratyczne, gradientowe (miksowanie wysoko i niskociśnieniowe), chromatografy jonowe oraz analizatory aminokwasów. Chromatografy SYKAM można wyposażyć detektory: UV/VIS, DAD (PDA), konduktometryczny, refraktometryczny, fluorescencyjny, rozproszenia światła (ELSD) i wiele innych.
SYKAM produkuje chromatografy i ich części w Niemczech.
SYKAM posiada siedzibę i zaawansowaną fabrykę w Bawarii, w miasteczku Eresing, wyposażoną w najnowocześniejsze automatyczne obrabiarki metalu i plastików. Holistyczne podejście tej firmy do produkcji sprawia, że nawet płytki elektroniczne są wytwarzane na miejscu. Dzięki temu wydatnie obniża się koszt produkcji a użytkownik płaci nie za koszty korporacyjne ale realne koszty produkcji chromatografu.
Derywatyzacja postkolumnowa jest zalecana przez Komisję Europejską do analizy aminokwasów .
Dokładna i powtarzalna analiza wszystkich aminokwasów na typowym zestawie HPLC bywa trudna, a nawet często niemożliwa dla użytkownika. Problem ten został dostrzeżony przez instytucje nadzorcze, laboratoria referencyjne i badaczy zainteresowanych tą tematyką. Komisja Europejska wydała zalecenie dotyczące metod analitycznych, które spełniają pokładane w nich nadzieje co do jakości i powtarzalności. Zostały one opisane w Dyrektywie 98/64/EC z 3 września 1998 roku, która dotyczy między innymi oznaczania aminokwasów w dodatkach żywieniowych.
Dostępny jest również raport Laboratorium Referencyjnego Unii Europejskiej (EURL) z 2011 roku dotyczący metod analitycznych stosowanych w oficjalnej kontroli dodatków żywieniowych.
Oba dokumenty odnoszą się do metody farmakopealnej z zastosowaniem rozdziału aminokwasów na kolumnie jonowymiennej, derywatyzacji postkolumnowej z odczynnikiem ninhydrynowym i detekcji fotometrycznej przy świetle o długości 440nm i 570nm.
Opisana metoda referencyjna wykorzystywana jest w automatycznym analizatorze aminokwasów Sykam.
Ile miejsca w laboratorium potrzebuję by pracować na aminoanalizatorze?
Pełny zestaw można ustawić tak jak każdy typowy chromatograf. Standardowe biurko będzie zupełnie wystarczające. Aminoanalizator ma zwartą budowę, obok zmieści się również wygodny zestaw komputerowy i niewielkie źródło azotu, np. 5 litrowa butla.
Modułowa budowa systemu
Aminoanalizator składa się z czterech podstawowych modułów t.j. autosamplera, pompy analitycznej, pompy mikro oraz hermetycznej komory odczynnikowej. Przedział kolumnowy z termostatem, reaktor derywatyzacyjny, degazer, detektor i pozostałe elementy układu zostały zintegrowane w wymienionych powyżej czterech modułach.
Sterowanie, jak w każdym obecnie chromatografie, powierzone jest komputerowi wyposażonemu w oprogramowanie do automatycznej kontroli całego procesu: iniekcji, rozdziału, derywatyzacji, detekcji, regeneracji kolumny, zbierania i integracji danych.
odczynniki umieszczone są w specjalnej komorze odczynnikowej na szczycie urządzenia. Wyposażona została ona w hermetyczną pokrywę z masywnego pleksiglasu, moduł chłodzenia wnętrza oraz system rozprowadzania gazu obojętnego, np. azotu, do wszystkich butelek z buforami i odczynnikami.
Chłodzenie i dopływ gazu mają kluczowy wpływ na przydatność odczynników do pracy, wydłużając ich żywotność z trzech miesięcy do dwunastu.
Źródło azotu może być dowolnego typu. Zestaw pochłania znikome ilości tego gazu, aby utrzymać obojętną atmosferę we wnętrzu butelek z odczynnikami. Dlatego nawet mała butla wystarcza na wiele lat.
Szkolenie i rozpoczęcie pracy
Ideą szkolenia wprowadzającego jest wdrożenie analityków do rutynowej pracy z aminoanalizatorem. Jest ono realizowane przez autoryzowanego dystrybutora firmy Sykam
W trakcie 3 dni spotkań realizowane są punkty t.j.:
- instalacja i uruchomienie analizatora
- szkolenie z obsługi systemu i jego budowy wraz z małym serwisem urządzenia
- przygotowanie próbki do badań
- ustawienie metod zgodnie ze specyfiką pracy użytkownika
- nauka obsługi oprogramowania i własnoręcznej zmiany parametrów rozdziału
- identyfikacja jakościowa i ilościowa aminokwasów
- integracja danych, tworzenie szablonu raportów
W trakcie szkolenia promujemy rozwój samodzielności użytkownika, tak aby nabył on biegłości w obsłudze.
Po ukończeniu szkolenia użytkownicy otrzymują producencki certyfikat potwierdzający wiedzę w zakresie obsługi aminoanalizatora Sykam. W razie późniejszych pytań pozostajemy do Państwa dyspozycji i zapewniamy pełną obsługę serwisową.
Przygotowanie próbki - jak zacząć
Producent aminoanalizatora Sykam wziął pod uwagę złożoność tego punktu pracy, dzieląc procedury zależnie od tego czy chcemy oznaczać aminokwasy po hydrolizie próbki czy aminokwasy wolne t.j. fizjologiczne.
W przypadku hydrolizatów opracowane zostały przykładowe procedury wraz z opisem ich zalet i wad, co pozwala dobrać warunki hydrolizy do własnych potrzeb.
Aminokwasy fizjologiczne oznaczane są wprost, wystarczy przefiltrować soki, ekstrakty. Ewentualnie rozcieńczyć dla lepszych wyników.
Procedury przygotowania próbek, jak i powiązane z nimi metodyki rozdziału są przedmiotem szkolenia wprowadzającego.
Analiza
Przygotowane próbki wstawiamy do autosamplera w fiolkach. Dla próbek wrażliwych utrzymywana jest niska temperatura, od 5 st. C. System rozpoczyna pracę poprzez nastrzyk i rozdział próbki na kolumnie. Rozdział przebiega wieloetapowo. Zależnie od opracowanej metodyki wykorzystuje się 2 lub 3 bufory w układzie gradientowym. Procedura przygotowana została przez producenta i wszystkie kroki gradientowe wykonywane są automatycznie. Eluat opuszczający kolumnę mieszany jest z odczynnikiem ninhydrynowym, a następnie w reaktorze postkolumnowym zachodzi reakcja uwidaczniająca poszczególne aminokwasy. Detekcja odbywa się przy wykorzystaniu optymalnych dla kompleksów długości fali 440nm i 570nm. Ostatnim krokiem jest przemywanie pętli reaktora i regeneracja kolumny przed kolejnym rozdziałem.
Cały proces zajmuje od 45 do 90 minut, średnio około 60 minut. Zależnie od liczby oznaczanych aminokwasów.
Wyniki i interpretacja danych
Wyniki rozdziałów prezentowane są chromatogramach i tabelach przez oprogramowanie Clarity. Identyfikacja jakościowa odbywa się automatycznie na podstawie wcześniejszej analizy wzorca aminokwasów. Poszczególne piki opisywane są automatycznie na chromatogramie, co eliminuje wątpliwości identyfikacyjne. Analiza ilościowa zależy od pola powierzchni piku, które porównywane są względem wzorca.
Ocena rozdziału jest przedmiotem szkolenia wstępnego, a wzorzec dostarczany jest wraz z pakietem startowym odczynników.
Zastosowania praktyczne - dla kogo?
Aminoanalizator zaprojektowany został z myślą o naukowcach potrzebujących łatwej i powtarzalnej analizy aminokwasów.
Typowe systemy oparte na HPLC z derywatyzacją prekolumnową zwykle cierpią na różne przypadłości, szczególnie w zakresie powtarzalności metod. A dopracowanie metodyki do akceptowalnego poziomu może zająć miesiące. Aminoanalizator Sykam jest zatem odpowiedzią na te problemy, dlatego świetnie sprawdzi się w badaniach:
- pasz i dodatków żywieniowych
- żywności i dodatków żywnościowych
- suplementów diety
- leków i suplementów farmaceutycznych
- peptydów, białek i ich budowy
- czystości półproduktów
- dodatków zapachowych
- niektórych antybiotyków, hormonów
- procesów mikrobiologicznych
- w diagnostyce metabolicznej, w tym chorób genetycznych jak bloki metaboliczne
- neuroprzekaźników i ich prekursorów
...i innych
Korzyści
Zakup Automatycznego Analizatora Aminokwasów SYKAM daje Państwu wymierne korzyści w zakresie:
- Szybkiej analizy aminokwasów w próbce. Średnio 60 minut wystarcza, aby otrzymać precyzyjny obraz składu jakościowego i ilościowego aminokwasów.
- Optymalnej powtarzalności wyników jakościowych i ilościowych
- Badań czystości w produkcji poprawiających kontrolę jakości. Pozwala to na ocenę realnej wartości surowców, pozwala osiągnąć oszczędności w zakupie półproduktów, a także wyższe zyski ze sprzedaży pełnowartościowych produktów końcowych.
- Rzetelnych wyników i optymalnej pracy od momentu ukończenia szkolenia wprowadzającego.
- Praktyki badawczej zgodnej z zaleceniami Komisji Europejskiej
Przykładowe rozdziały, czego mogę oczekiwać
Poniżej prezentujemy przykładowe rozdziały próbek. Kliknięcie powiększa obraz.
Dodatkowe informacje
Aminoanalizator Sykam umożliwia podłączenie zewnętrznych detektorów i pełną ich obsługę poprzez oprogramowanie Clarity. Opcja ta jest popularnym rozwiązaniem wśród naszych klientów. Tak zbudowane urządzenia hybrydowe zapewniają jednocześnie pełną funkcjonalność w zakresie aminoanalizy jak i wykorzystania systemu jako zestawu HPLC. Bogata oferta detektorów, kolumn HPLC, zaworów i szerokie możliwości oprogramowania Clarity powodują, że podczas jednego zakupu możecie Państwo zrealizować wiele potrzeb aparaturowych. Elastyczność takiego systemu jest jego mocną cechą.
System powinien być wyposażony w butlę (azot) z reduktorem. Zalecamy też stosowanie podtrzymania zasilania, UPS, w razie zakłóceń dostaw prądu.
Do sterowania automatycznym analizatorem SYKAM wykorzystywane jest dedykowane oprogramowanie Clarity DataApex:
